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2.1 浸取液的准备
2.2 浸取
2.3 过滤
2.4 培养
2.5 结果
本试验的目的是通过薄膜过滤检测附着在胶塞上的所有适应中性温度的需氧植物和发酵物及土壤的残留物,并对这些过滤物进行培养。
2.1 浸取液的准备
浸取液为含0．9%的NaCl 溶液(用蒸馏水)，并加入1ml的非离子活性剂。
将上述浸取液倒入一合适的玻璃容器至标有400ml 处，然后再将该容器放入高压锅内在121℃下保持30分钟进行彻底消毒。
注：该实验需两个玻璃容器，一个用于过滤适应中性温度的需氧植物残留物，另一个用于发酵物及土壤残留物的过滤。
2.2 浸 取
确定总面积为200平方厘米的胶塞数量。
接着，将上述数量的胶塞放入400ml经高温消毒后的溶液中。
用力摇动容器，并保持1小时，再摇动该容器30分钟，在过滤前1分钟内再摇一次。
按上述步骤在不放胶塞的情况下再操作一次。
2.3 过滤
测试所使用的设备是带一漏斗的真空不锈钢过滤器。该过滤器的不锈钢部分在使用前必须经消毒处理。
对于每个测试必须进行：（所有适应中性温度的需氧植物和发酵物及土壤）
-用消过毒的工具将无菌薄膜贴放在过滤器的漏斗上。
-过滤浸取液。
-用消过毒的工具将过滤出的残留物放到适当的培养物中。
适应中性温度的需氧植物残留物：大豆类培养基
发酵物及土壤残留物：Saubouraud 培养基
-按上述步骤任意操作一次。
根据上述操作程序，将蒸馏水改用一般的城市用水不经消毒制成400ml溶液再过滤一次。
2.4 培养
培养薄膜上残留物的温度如下：
-适应中性温度的需氧植物（大豆类培养基）：36℃±1℃保持48小时。
-发酵物及土壤（Saubouraud 培养基）：27.5℃±2.5℃保持5天。
2.5 结果
比较每块薄膜。
结果表示如下：
N：总面积为200平方厘米的胶塞数量。
R：薄膜标识（用CFU表示）。
R/20：表示为CFU/10平方厘米。
R/N：表示为CFU/胶塞。
符合以下规定的胶塞则合格。
适应中性温度的需氧植物残留物 |
<2.5CFU/10平方厘米胶塞面积 |
发酵物及土壤残留物 |
无 |
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